Botaniska trädgården ligger mellan Rudbeckianska skolan och Stadsbiblioteket, strax nordöst om Domkyrkan. Den är Sveriges äldsta gymnasieträdgård, anlagd på uppdrag av Johannes Rudbeckius.
Här har elever sedan 1700-talet hämtat kunskaper. Trädgården var från början en kålgård som ödeslades 1714.
I mitten av 1700-talet anlade en av Carl von Linnés lärljungar, lektor Carlbaum, en Hortus botanicus. I början av 1900-talet utvecklades trädgården med hjälp av bland annat professor Rutger Sernander till en högklassisk botanisk trädgård.